一、什么是分光光度計(jì)?
A.分光光度計(jì)是一種測(cè)量樣品吸收的光量的儀器。
B.分光光度計(jì)技術(shù)通常用于通過(guò)測(cè)量放置在分光光度計(jì)中的比色杯中溶液吸收的光量來(lái)測(cè)量溶液中的溶質(zhì)濃度。
C.國(guó)家技術(shù)實(shí)驗(yàn)室(NTL)的科學(xué)家Arnold J. Beckman及其同事于1940年發(fā)明了Beckman DU分光光度計(jì)。
二、分光光度計(jì)的原理
分光光度計(jì)技術(shù)是根據(jù)波長(zhǎng)測(cè)量光強(qiáng)。它通過(guò)將光束衍射到一個(gè)波長(zhǎng)光譜中,使用電荷耦合器件檢測(cè)強(qiáng)度,然后將結(jié)果以圖形形式顯示在檢測(cè)器上,然后顯示在顯示設(shè)備上來(lái)實(shí)現(xiàn)。
A.在分光光度計(jì)中,使用棱鏡(或)光柵將入射光束分成不同的波長(zhǎng)。
B.通過(guò)適當(dāng)?shù)臋C(jī)制,可以操縱特定波長(zhǎng)的波落在測(cè)試溶液上。入射光的波長(zhǎng)范圍可以低至1-2nm。
C.分光光度計(jì)可用于測(cè)量化合物的吸收光譜,即溶液在每個(gè)波長(zhǎng)下對(duì)光的吸收。
三、分光光度計(jì)儀器的基本組件包括:
1.桌子和廉價(jià)的輻射能源
可以通過(guò)高壓放電(或電加熱)激發(fā)到高能態(tài)的材料是優(yōu)良的輻射能源。
2.單色儀,將多色輻射分解為多個(gè)波長(zhǎng)的組成波段。
單色儀將多色輻射分解成單獨(dú)的波長(zhǎng),并將這些波長(zhǎng)隔離成非常窄的波段。
3.棱鏡:
棱鏡通過(guò)在不同程度上反射不同波長(zhǎng)的能力,將來(lái)自光源的多色光分散到其組成波長(zhǎng)中.
商用儀器通常使用兩種棱鏡。即600角石英棱鏡和300利特羅棱鏡。
4.柵欄:
光柵通常用于紫外、可見(jiàn)光和紅外區(qū)域的分光光度計(jì)的單色器中。
5.用于保存樣品的運(yùn)輸容器(反應(yīng)杯)
在紫外(或)可見(jiàn)光區(qū)域進(jìn)行研究的樣品通常是玻璃(或)溶液,放在稱(chēng)為“試管”的試管中。
用于可見(jiàn)光區(qū)域的比色杯由普通玻璃(或有時(shí)是石英)制成。
6.光敏探測(cè)器及相關(guān)讀出系統(tǒng)
大多數(shù)探測(cè)器依賴(lài)于光電效應(yīng)。電流與光的強(qiáng)度成正比,因此是對(duì)它的測(cè)量。
輻射探測(cè)器產(chǎn)生與發(fā)射器光成比例的電子信號(hào)。
這些信號(hào)需要轉(zhuǎn)換成易于理解的形式。
這是通過(guò)使用放大器、電流表、電位計(jì)和電位記錄器來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
四、分光光度計(jì)的一些主要應(yīng)用領(lǐng)域:
物質(zhì)濃度檢測(cè)
雜質(zhì)檢測(cè)
有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)闡明
監(jiān)測(cè)淡水和海洋生態(tài)系統(tǒng)中的溶解氧含量
蛋白質(zhì)表征
檢測(cè)官能團(tuán)
醫(yī)院呼吸氣體分析
化合物的分子量測(cè)定